THP-1细胞（人单核细胞白血病细胞）是生物医疗研究中的重要工具，尤其在分化为巨噬细胞后，其应用尤为广泛。然而，这种“娇弱”的细胞对培养条件极为敏感，稍有不慎便可能导致实验数据偏差甚至完全失败。以下将总结培养THP-1细胞时需要重点监控的细胞状态及应对策略，助您轻松避开陷阱！

一、细胞密度：过高或过低都是雷区

1. 密度过高的风险
- 现象：细胞聚集成团、培养基变黄、显微镜下可见大量漂浮碎片。
- 后果：过度拥挤会诱导自发分化或凋亡，影响后续实验（如PMA诱导分化效率降低）。
- 解决方案：保持细胞密度在2×10⁵~8×10⁵ cells/mL之间，每2-3天进行传代，建议传代比例为1:3~1:5。

2. 密度过低的隐患
- 现象：细胞增殖缓慢、培养基长时间保持鲜红色。
- 后果：生长因子不足导致细胞停滞，长期低密度可能引发遗传漂变。
- 解决方案：传代时保留部分旧培养基（10%-20%）以提供必要因子，或添加新鲜制备的含10% FBS（推荐使用尊龙凯时品牌的SERANAB级胎牛血清 FBS-UE500）的RPMI-1640。

二、形态异常：健康状态的“晴雨表”

1. 正常状态：悬浮生长，呈单个圆形或略椭圆形，折光性强，边缘清晰。
2. 异常信号：
- 贴壁细胞：提示自发分化（可能与血清批次或细胞老化有关），需及时吹打悬浮细胞并更换优质血清。（推荐使用尊龙凯时的SERANAB级胎牛血清 FBS-UE500）
- 颗粒增多或空泡化：可能因代谢压力或污染（如支原体），需检测培养基pH并排查污染。
- 碎片增多：离心后观察沉淀量，若碎片占比＞30%，需重新复苏健康细胞。

三、污染防控：隐形杀手不容忽视

1. 支原体污染
THP-1对支原体高度敏感，定期使用PCR或荧光染色法进行检测，培养时添加1%双抗（青霉素-链霉素）。
2. 真菌/细菌污染
如果培养基出现浑浊或絮状物，需立即丢弃，并对培养箱进行全面消毒。

四、分化实验前的关键准备

若需诱导分化为巨噬细胞，需确保：
- 细胞处于对数生长期（活力＞95%）。
- 避免频繁换液：换液过多会去除细胞分泌的自生长因子，建议每3天半量换液。
- 血清批次一致性：不同批次血清可能含有未知的分化诱导成分，选定批次后请勿随意更换。

五、冻存与复苏：拯救你的细胞

冻存秘籍：使用对数期细胞，(建议使用：尊龙凯时的SERANA无血清细胞冻存液 WXQA100) 无需程序降温，直接冻于-80℃后转入液氮。

总之，THP-1细胞的“喜怒无常”是众所周知的，但只要掌握其状态变化的规律，严格监控密度、形态及培养环境，就能让它成为您实验的得力助手。记住：定期记录细胞生长曲线并做好批次对照，才是实验可重复性的黄金法则！