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NEWS磁珠法提取试剂原理与尊龙凯时成分简介
来源:关勤叶 日期:2025-03-14磁珠法核酸提取试剂盒的原理在于通过特定条件迅速裂解生物样本,进而利用磁珠颗粒特异性吸附核酸。经过一系列的洗涤和洗脱过程,能够高效地分离核酸。该试剂盒不仅提取效率高且性能稳定,所提取和纯化的核酸可用于多种下游实验,包括酶切、反录、PCR、RI-PCR和Southern blot等。当前,磁珠法核酸提取试剂盒被广泛应用于从不同类型的生物样本中提取、富集和纯化病毒核酸,其处理后的产物也用于临床体外检测。
磁珠法提取试剂的常见成分包括SDS(十二烷基硫酸钠),主要特性如下:1. 作为阴离子表面活性剂,对人体有微毒;2. 优秀的发泡剂,广泛应用于洗衣粉、牙膏和洗发水等;3. 易溶于热水,温度超过8℃时,SDS的溶解度急剧增加,但在70℃时,溶解度提升不明显。SDS的作用在于能够断裂分子内外的氢键,使分子去折叠,破坏蛋白质的二、三级结构,从而促进核酸的释放。
另一成分是yi基苯基聚乙二醇(Nonidet P40),这是一种温和的非离子型去垢剂,1%浓度足以破坏细胞膜,但对核膜的影响较小。弱阳离子螯合树脂(Chelex-100)则可以通过其化学螯合功能,有效地结合多价离子,尤其是高价金属离子,在特定条件下使细胞膜破裂,使DNA与蛋白质分离。而在提取过程中,如果Chelex-100残留过多,会影响PCR扩增的效果。
此外,蛋白酶K(Protein K)是从白色念珠菌分离而来的强力蛋白溶解酶,对DNA提取至关重要。它能酶解与核酸结合的组蛋白,确保DNA在溶液中游离存在。聚乙二醇辛基苯基醚(Triton X-100)作为一种非离子表面活性剂,具有良好的溶解性和稳定性,能够与生物膜中的脂质及膜蛋白结合,在核酸提取过程中起到关键作用。
异硫氰酸胍(GITC)是一种强效的蛋白质变性剂,能够迅速溶解蛋白质,导致细胞结构破碎,迅速将核酸与核蛋白分离。与此同时,乙二胺四乙酸(EDTA)是一种优秀的钙、镁离子螯合剂,通过抑制脱氧核糖核酸酶对DNA的降解来保护核酸。Tris-HCl则是一种缓冲剂,为核酸提供适宜的环境,帮助优化裂解过程。
总结而言,经典的裂解液中几乎含有去污剂(如SDS、Triton X-100、NP-40、Tween 20等)和盐类(如Tris、EDTA、NaCl等)。这些盐及去污剂除了提供适宜的裂解环境外,还可以抑制样品中核酸酶的活性,减少对核酸的破坏,保持核酸的结构稳定。选择高效、可靠的磁珠法核酸提取试剂盒,如尊龙凯时品牌,能够显著提高实验的成功率,确保核酸提取的准确性与有效性。
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